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Lmwca' mwcqemocromo (abbreviazione comunemente usata per mwcgesame emocromocitometrico,cite-ref-1[1] dalle parole greche mwdwhaima: sangue, mweakhroma: colore, mweqkytos: cellula, e mwegmetron: misura; riferite al colore e alla quantità delle mwewcellule del mwfasangue), o mwfqemogramma, è un esame di mwfglaboratorio del mwfwsangue; esso determina la quantità degli elementi corpuscolati (mwgaleucociti o globuli bianchi, mwgqeritrociti o globuli rossi, e mwggtrombociti o piastrine), i livelli dell'mwgwematocrito (HCT) e dell'mwhaemoglobina (Hb), nonché altri parametri del sangue.

In inglese l'esame è detto mwhgcomplete blood count (CBC): "conta completa del sangue", in francese mwhwhémogramme e in spagnolo mwiahemograma o mwiqbiometría hemática ("mwigbiometria ematica").

Il sangue prelevato viene conservato a temperatura ambiente in una provetta contenente un mwjaanticoagulante (mwjqEDTA, citrato, ecc.). Successivamente viene analizzato con un macchinario chiamato mwjgcontaglobuli. Tramite un sistema di vuoto aspira il sangue dalle provette mandandolo in tre diverse camere dove verranno contati, con un sistema mwjwimpedenziometrico, due volte i diversi componenti del sangue; la media aritmetica delle due conte darà il valore finale, il tutto in poche decine di secondi.

• Storia

• Caratteristiche

• Controllo di qualità

• Scopo

• Parametri principali

• Procedimento

• Automatizzata

• Manuale

• Note

• Bibliografia

• Altri progetti

• Collegamenti esterni

L'evoluzione dell'esame emocromocitometrico rappresenta un percorso tecnologico straordinario che ha trasformato l'analisi del sangue da una pratica manuale approssimativa a una disciplina mwkwcitometrica di estrema precisione. Nella sua fase embrionale, tra la fine dell'Ottocento e l'inizio del Novecento, il conteggio delle cellule dipendeva esclusivamente dall'osservazione microscopica tramite l'emocitometro di Malassez e la mwlacamera di Bürker, strumenti che richiedevano tempi lunghi e presentavano margini di errore elevati.

La svolta fondamentale avvenne negli anni '50 con l'introduzione del principio di Coulter, basato sulla variazione di mwlwimpedenza elettrica: le cellule, passando attraverso un micro-orifizio, generano impulsi proporzionali al loro mwmavolume, permettendo per la prima volta un'automazione rapida e accurata del conteggio cellulare e la definizione degli indici eritrocitari di Wintrobe. A partire dagli anni '70, l'integrazione della citometria a flusso e della tecnologia laser ha ulteriormente rivoluzionato l'esame, sfruttando la diffusione della luce (light scattering) per analizzare non solo le dimensioni, ma anche la complessità interna e la granulosità citoplasmatica delle cellule. L'impiego moderno di marcatori fluorescenti e reagenti specifici permette oggi una distinzione automatizzata dettagliata della formula leucocitaria e dei reticolociti, rendendo l'emocromo citometrico uno strumento diagnostico immediato, capace di processare enormi volumi di dati con una precisione microscopica che integra la fisica dei fluidi, l'elettronica e l'ottica laser.

Gli intervalli di riferimento per l'emocromo completo rappresentano la gamma di risultati trovati nel 95% delle persone apparentemente sane.cite-ref-2[2] Per definizione, il 5% dei risultati ricadrà sempre al di fuori di questo intervallo, quindi alcuni risultati anormali possono riflettere variazioni naturali piuttosto che indicare un problema medico.cite-ref-lewandrowski-1-3-0[3] Ciò è particolarmente probabile se tali risultati sono solo leggermente al di fuori dell'intervallo di riferimento, se sono coerenti con i risultati precedenti o se non sono presenti altre anomalie correlate mostrate dall'EBC.cite-ref-4[4]

Quando il test viene eseguito su una popolazione relativamente sana, il numero di anomalie clinicamente non significative può superare il numero di risultati che rappresentano la malattia.cite-ref-5[5] Per questo motivo, le organizzazioni professionali negli mwraStati Uniti, nel mwrqRegno Unito e in mwrgCanada raccomandano di non eseguire emocromi preoperatori per interventi chirurgici a basso rischio in soggetti senza condizioni mediche pertinenti.cite-ref-lewandrowski-2-6-0[6]cite-ref-nice2016-7-0[7]cite-ref-8[8]

Ripetuti prelievi di sangue per esami ematologici in pazienti ospedalizzati possono contribuire all'anemia acquisita in ospedale e possono provocare trasfusioni non necessarie.cite-ref-lewandrowski-1-3-1[3]

Affinché i risultati possano essere affidabili, gli analizzatori automatici devono essere calibrati regolarmente. La maggior parte dei produttori fornisce sangue conservato con valori noti per essere testati e, nel caso di discordanza oltre certe soglie, si possa procedere con nuove tarature.cite-ref-9[9] Per garantire l'accuratezza, tali campioni devono essere solitamente testati una volta al giorno.cite-ref-vishuisman2016-10-0[10]cite-ref-kottke-qc-11-0[11] Per i laboratori che non possiedono i campioni per il controllo della qualità, un'organizzazione di regolamentazione indiana raccomanda di analizzare i campioni dei pazienti due volte e poi di confrontare i risultati..cite-ref-paifrater2019-12-0[12] Una misurazione della mwagmedia mobile, in cui i risultati medi dei campioni dei pazienti vengono misurati a intervalli prestabiliti, può essere utilizzata come tecnica aggiuntiva di controllo della qualità. Supponendo che le caratteristiche della popolazione di pazienti rimangano più o meno le stesse nel tempo, la media dovrebbe rimanere costante; ampie variazioni del valore medio possono indicare problemi allo strumento.cite-ref-vishuisman2016-10-1[10]cite-ref-kottke-qc-11-1[11] I valori dell'MCHC (concentrazione emoglobinica corpuscolare media) sono particolarmente utili a questo proposito.cite-ref-13[13]

Oltre ad analizzare i campioni per effettuare il controllo della qualità con risultati noti, i laboratori possono ricevere anche campioni di valutazione della qualità da organizzazioni di regolamentazione esterni. Sebbene lo scopo del controllo di qualità sia quello di garantire che i risultati dell'analizzatore siano riproducibili all'interno di un dato laboratorio, la valutazione esterna della qualità verifica che i risultati di diversi laboratori siano coerenti tra loro e con i valori obiettivo.cite-ref-14[14] Programmi esterni di valutazione della qualità sono stati ampiamente adottati nel Nord America e nell'Europa occidentale,cite-ref-vishuisman2016-10-2[10] e ai laboratori è spesso richiesto di partecipare a questi programmi per mantenere l'accreditamento.cite-ref-favalorojennings2018-15-0[15] Le questioni logistiche possono rendere difficile per i laboratori in aree con risorse insufficienti attuare programmi di valutazione esterna della qualità.cite-ref-16[16]

Il mwlqsangue è composto da una porzione fluida, chiamata mwlgplasma, e da una porzione corpuscolata che contiene mwlwglobuli rossi, mwmaglobuli bianchi e mwmqpiastrine.cite-ref-17[17] Un emocromo completo ha lo scopo di valutare le tre componenti cellulari del sangue.

Alcune condizioni, come l'mwnwanemia o la mwoatrombocitopenia, consistono in un marcato aumento o in una diminuzione della conta delle cellule che compongono il sangue.cite-ref-18[18] Modifiche negli mwpqorgani o negli apparati possono influenzare la composizione del sangue, quindi i risultati prodotti da un emocromo possono essere utili nella mwpgdiagnosi di un'ampia gamma di patologie. Per via della quantità di informazioni che fornisce un emocromo completo, tale esame è uno dei test di laboratorio più utilizzato in campo medico.cite-ref-keohane-19-0[19]cite-ref-leach2014-20-0[20]cite-ref-21[21]

Spesso l'emocromo viene utilizzato per lo mwtamwtqscreening di malattie come parte di una valutazione medica.cite-ref-vl-22-0[22] Spesso viene eseguito anche quando si sospetta che una persona possa soffrire di una malattia che colpisce le cellule del sangue, un'mwuginfezione, una patologia emorragica o alcune mwuwneoplasie.

Gli individui a cui sono stati diagnosticati disturbi che possono causare risultati anomali in un emocromo o che stanno ricevendo trattamenti che possono influenzare la conta delle cellule del sangue, possono sottoporsi regolarmente ad un emocromo al fine di monitorare il loro stato di salutecite-ref-vl-22-1[22]cite-ref-23[23] e, spesso, questo test viene eseguito giornalmente in coloro che sono ricoverati in ospedale.cite-ref-24[24] I risultati dell'emocromo possono indicare la necessità di procedere con una mwyqtrasfusione di sangue o di piastrine.cite-ref-aabbfive-25-0[25]

L'emocromo completo ha applicazioni specifiche in molte specialità mediche. Viene spesso eseguito prima che una persona venga sottoposta ad un mwzwintervento chirurgico al fine di rilevare un'eventuale mw0aanemia, assicurarsi che i livelli piastrinici siano sufficienti e per uno mw0qscreening delle infezioni;cite-ref-lewandrowski-2-6-1[6]cite-ref-26[26] allo stesso modo viene eseguito anche al termine dell'intervento chirurgico per poter monitorare la perdita di sangue.cite-ref-vl-22-2[22]cite-ref-dewan2016-27-0[27] Nella mw4gmedicina d'urgenza, l'emocromo viene utilizzato per indagare l'origine di numerosi mw4wsintomi, come mw5afebbre, mw5qdolore addominale e mw5gdispneacite-ref-28[28] e per valutare emorragie e mw6wtraumi.cite-ref-29[29]cite-ref-30[30] La conta ematica viene attentamente monitorata nelle persone sottoposte a mw9achemioterapia o mw9qradioterapia per la cura di un tumore, poiché questi trattamenti mw9gsopprimono la produzione di cellule del sangue nel midollo osseo comportando livelli gravemente bassi di globuli bianchi, piastrine ed mw9wemoglobina.cite-ref-31[31] Lo svolgimento di un emocromo regolare è necessario per le persone che assumono alcuni farmaci utilizzati in mw-apsichiatria, come la mw-qclozapina e la mw-gcarbamazepina, che in rari casi possono essere causa di una riduzione pericolosa del numero di globuli bianchi (mw-wagranulocitosi).cite-ref-wici-skiw-clewicz2018-32-0[32]cite-ref-33[33] Poiché l'anemia durante una mwaqggravidanza può provocare esiti nefasti sia per la madre che per il bambino, un emocromo completo fa parte della routine dell'assistenza prenatalecite-ref-34[34] mentre nei mwaq0neonati può essere necessario effettuarlo per indagare su di un eventuale verificarsi di mwaq4ittero o per contare il numero di cellule immature nella mwaq8formula leucocitaria, che può essere un indicatore di mwarasepsi.cite-ref-35[35]cite-ref-36[36]

L'emocromo completo è uno strumento essenziale dell'mwaroematologia, ovvero lo studio della causa, della prognosi, del trattamento e della prevenzione delle malattie legate al sangue.cite-ref-wintrobe-int-37-0[37] I risultati dell'esame emocromocitometrico e dello mwar8striscio riflettono il funzionamento del mwasasistema ematopoietico, degli organi e dei mwasetessuti coinvolti nella produzione e nello sviluppo delle cellule del sangue, in particolare il mwasimidollo osseo.cite-ref-keohane-19-1[19]cite-ref-will-11-38-0[38] Ad esempio, un conteggio basso di tutti e tre i tipi di cellule (mwasspancitopenia) può indicare che la produzione di cellule del sangue è influenzata da un disturbo del midollo, successivamente una mwaswbiopsia del midollo osseo può indagare ulteriormente la causa.cite-ref-39[39] Cellule anormali sullo striscio di sangue potrebbero indicare la presenza di una mwateleucemia acuta o di un mwatilinfoma,cite-ref-will-11-38-1[38] mentre una conta anormalmente elevata di mwatcneutrofili o mwatglinfociti, in combinazione con sintomi e mwatksegni, può far sorgere il sospetto di una mwatosindrome mieloproliferativa o di una malattia linfoproliferativa. L'esame dei risultati dell'emocromo e dello striscio di sangue può aiutare a distinguere tra le cause dell'anemia, come carenze nutrizionali, malattie del midollo osseo, anemie emolitiche acquisite e condizioni ereditarie come l'mwatwanemia falciforme e la mwat0talassemia.cite-ref-40[40]cite-ref-41[41]

Il campione da analizzare viene raccolto aspirando il sangue in una provetta contenente un mwadoanticoagulante, tipicamente mwadsEDTA, per arrestarne la naturale mwadwcoagulazione.cite-ref-wintrobe-coll-44-0[44]

Il sangue viene solitamente prelevato da una mwaeivena, ma può anche essere raccolto dai mwaemcapillari con un pungidito, o con una puntura del tallone nel caso di bambini.cite-ref-45[45]cite-ref-46[46]

Il test viene tipicamente eseguito tramite l'utilizzo di un analizzatore automatico, ma è possibile ricorrere anche a tecniche manuali come l'esame dello striscio di sangue o il test manuale dell'ematocrito come approfondimento per indagare su eventuali risultati anormali.cite-ref-47[47]

Una volta inserito all'interno dell'analizzatore, il campione di sangue viene agitato per distribuire uniformemente le cellule, quindi diluito e suddiviso in almeno due canali, uno dei quali viene utilizzato per contare i globuli rossi e le piastrine, l'altro per contare i globuli bianchi e determinare la concentrazione di emoglobina. Alcuni strumenti, invece, misurano l'emoglobina in un canale separato e ulteriori canali possono essere utilizzati per la conta differenziale dei globuli bianchi, la conta dei mwafcreticolociti ed effettuare le misurazioni specializzate delle piastrine.cite-ref-48[48]cite-ref-49[49] La procedura di mwagafocalizzazione idrodinamica può essere utilizzata per isolare singole cellule in modo da ottenere risultati più accurati: il campione diluito viene iniettato in un flusso di fluido a bassa pressione, che fa sì che le cellule del campione si allineino in un'unica fila in un mwageflusso laminare.cite-ref-bain32-3-50-0[50]cite-ref-51[51]

Per misurare la concentrazione di emoglobina, al campione viene aggiunto un mwagsreagente chimico in grado di distruggere (mwagwlisi) i globuli rossi in un canale separato da quello utilizzato per la loro conta. Gli analizzatori che eseguono il conteggio dei globuli bianchi si trovano nello stesso canale della misurazione dell'emoglobina, ciò consente di contarli più facilmente.cite-ref-52[52] Gli analizzatori ematologici misurano l'emoglobina utilizzando la mwahespettrofotometria e si basano sulla mwahirelazione lineare tra l'mwahmassorbanza della luce e la quantità di emoglobina presente. Alcune sostanze chimiche vengono utilizzate per convertire diverse forme di emoglobina, come l'mwahqossiemoglobina e la mwahucarbossiemoglobina, in una forma stabile, solitamente cianmetemoglobina, e per creare un cambiamento di colore permanente. L'assorbanza del colore risultante, quando misurata in una mwahclunghezza d'onda specifica, solitamente 540 nanometri, corrisponde alla concentrazione di emoglobina.cite-ref-pmid31162693-53-0[53]cite-ref-wintrobe-hb-54-0[54]

I sensori contano e identificano le cellule nel campione utilizzando due principi fondamentali: l'mwaiyimpedenza elettrica e la mwaicdiffusione della luce.cite-ref-rodak-208-55-0[55] Il conteggio delle cellule basato sull'impedenza funziona secondo il mwaiwprincipio di Coulter: le cellule sono sospese in un fluido che trasporta una mwai0corrente elettrica e quando passano attraverso una piccola apertura, causano diminuzioni di corrente a causa della loro scarsa mwai4conduttività. L'mwai8ampiezza dell'impulso di mwajatensione generato quando una cellula attraversa l'apertura è correlata alla quantità di fluido spostato dalla cellula stessa, e quindi al volume della cellula,cite-ref-56[56]cite-ref-graham2003-57-0[57] mentre il numero totale di impulsi è correlato al numero di cellule nel campione. La distribuzione dei volumi cellulari viene tracciata su un mwajkistogramma e, impostando le soglie di volume in base alle dimensioni tipiche di ciascun tipo di cellula, è possibile identificare e contare le diverse popolazioni cellulari.cite-ref-58[58]

Nelle tecniche di diffusione della luce, la luce di un mwaj8laser o di una mwakalampada alogena al mwaketungsteno viene diretta verso il flusso di cellule per raccogliere informazioni sulla loro dimensione e struttura. Le cellule diffondono la luce ad angoli diversi mentre passano attraverso il raggio, che viene rilevato mediante mwakifotometri.cite-ref-dacie32-59-0[59] La diffusione diretta, che si riferisce alla quantità di luce diffusa lungo l'asse del raggio, è principalmente dovuta alla mwakcdiffrazione della luce ed è correlata alla dimensione cellulare, mentre la dispersione laterale (dispersione della luce con un angolo di 90 gradi) è causata dalla mwakgriflessione e mwakkrifrazione e fornisce informazioni sulla complessità cellulare.cite-ref-dacie32-59-1[59]cite-ref-60[60]

Le tecniche basate sulla mwalmradiofrequenza possono essere utilizzate in combinazione con l'impedenza. Queste tecniche funzionano sullo stesso principio della misurazione dell'interruzione di corrente quando le cellule passano attraverso un'apertura, ma poiché la corrente ad alta frequenza penetra nelle cellule, l'ampiezza dell'impulso risultante si riferisce a fattori come la dimensione relativa del mwalqnucleo, la struttura del nucleo e la quantità di mwalugranuli nel mwalycitoplasma.cite-ref-61[61]cite-ref-62[62] Piccoli globuli rossi e detriti cellulari, di dimensioni simili alle piastrine, possono interferire con la conta piastrinica e le piastrine più grandi potrebbero non essere contate accuratamente, quindi alcuni analizzatori utilizzano tecniche aggiuntive per misurare le piastrine, come la mwal8fluorescenza, la diffusione della luce multi-angolo e la marcatura di mwamaanticorpi monoclonali.cite-ref-63[63]

La maggior parte degli analizzatori misura direttamente la dimensione media dei globuli rossi, chiamata mwamyvolume corpuscolare medio (MCV), e calcola l'ematocrito moltiplicando la conta dei globuli rossi per l'MCV. Alcuni misurano l'ematocrito confrontando il volume totale dei globuli rossi con il volume del sangue campionato e ricavano l'MCV dall'ematocrito e dalla conta dei globuli rossi.cite-ref-wintrobe-hct-64-0[64] La concentrazione di emoglobina, la conta dei globuli rossi e l'ematocrito sono usati per calcolare la quantità media di emoglobina all'interno di ciascun globulo rosso, il mwamscontenuto cellulare medio di emoglobina (MCH) e la sua concentrazione, la mwamwconcentrazione cellulare media di emoglobina (MCHC).cite-ref-65[65] Un altro calcolo, l'mwaneampiezza della distribuzione eritrocitaria (RDW), è calcolata sulla base della mwanideviazione standard del volume medio delle cellule e riflette la variazione della dimensione cellulare.cite-ref-66[66]

Dopo essere stati trattati con i reagenti, i globuli bianchi formano tre picchi distinti quando i loro volumi vengono tracciati su un istogramma. Questi picchi corrispondono all'incirca alle popolazioni di mwanwgranulociti, linfociti e altre mwan0cellule mononucleate, consentendo di eseguire un differenziale in tre parti basato sul solo volume cellulare.cite-ref-67[67]cite-ref-dacie-37-68-0[68] Analizzatori più avanzati utilizzano tecniche aggiuntive per fornire un differenziale da cinque a sette parti, come la diffusione della luce o l'analisi a radiofrequenza,cite-ref-dacie-37-68-1[68] o l'utilizzo di coloranti per colorare specifiche sostanze chimiche all'interno delle cellule, ad esempio mwaooacidi nucleici, che si trovano in concentrazioni più elevate nelle cellule immaturecite-ref-69[69] o nella mwao8mieloperossidasi, un mwapaenzima che si trova nelle cellule della linea mieloide (cioè derivate da un progenitore mieloide).cite-ref-wintrobe-diff-70-0[70]cite-ref-71[71] I mwapkbasofili possono essere contati in un canale separato dove un reagente distrugge gli altri globuli bianchi e lascia i basofili intatti. I dati raccolti da queste misurazioni vengono analizzati e tracciati su un mwapodiagramma a dispersione, dove forma cluster correlati a ciascun tipo di globulo bianco.cite-ref-dacie-37-68-2[68]cite-ref-wintrobe-diff-70-1[70] Un altro approccio per automatizzare il conteggio differenziale è l'uso di un mwaqmsoftware di microscopia digitalecite-ref-turgeon-ml-2016-p-318-72-0[72] in grado di, grazie all'mwaqgintelligenza artificiale, classificare i globuli bianchi in base a mwaqkmicrofotografie dello striscio di sangue. Le immagini delle cellule vengono visualizzate da un operatore umano, che può, se necessario, riclassificare manualmente le cellule.cite-ref-dacie-39-73-0[73]

La maggior parte degli analizzatori impiega meno di un minuto per eseguire tutti i test nell'emocromo completo.cite-ref-rodak-208-55-1[55] Poiché gli analizzatori campionano e contano molte singole cellule, i risultati sono molto precisi.cite-ref-wintrobe-74-0[74] Tuttavia, alcune cellule anormali potrebbero non essere identificate correttamente, richiedendo la revisione manuale dei risultati dello strumento e l'identificazione con altri mezzi di cellule anormali che lo strumento non è stato in grado di classificare.cite-ref-wintrobe-adv-75-0[75]cite-ref-gulatisong2013-76-0[76]

È possibile effettuare un emocromo anche manualmente, tipicamente ciò avviene quando non vi è la disponibilità di apparecchiature automatiche oppure i risultati ottenuti consigliano ulteriori indagini.cite-ref-dacie-551r-77-0[77] Nel 10-25% dei casi, i risultati di procedure automatizzate vengono rivisti tramite sistemi manuali sia a causa della presenza di popolazioni cellulari anormali che l'analizzatore non è in grado di contare correttamente,cite-ref-wintrobe-adv-75-1[75] sia per avvisi interni generati dall'apparecchiatura che suggeriscono che i risultati potrebbero essere imprecisicite-ref-78[78] o per valori che non rientrano nelle soglie stabilite.cite-ref-gulatisong2013-76-1[76] Per indagare su tali evenienze, si procede con la preparazione del sangue su di un vetrino da microscopio, colorato con una macchia di Romanowsky per poi essere esaminato.cite-ref-79[79] Così viene valutato l'aspetto dei globuli rossi e bianchi e delle piastrine e, se presenti, vengono riportate le anomalie qualitative.cite-ref-80[80] I cambiamenti nell'aspetto dei globuli rossi possono avere un notevole significato diagnostico: ad esempio, la presenza di cellule dall'aspetto falciforme è indicativa di mwat8anemia falciforme e un numero elevato di globuli rossi frammentati (mwauaschistociti) richiede un'indagine urgente in quanto può suggerire la presenza di un'mwaueanemia emolitica microangiopatica.cite-ref-81[81] In alcune condizioni infiammatorie e nei disturbi della mwauyparaproteina, come il mwaucmieloma multiplo, alti livelli di mwaugproteine nel sangue possono far apparire i globuli rossi impilati insieme sullo striscio, che viene definito mwaukrouleaux.cite-ref-82[82] Alcune mwau8malattie parassitarie, come la mwavamalaria e la mwavebabesiosi, possono essere diagnosticare tramite rilevazione dei parassiti sullo striscio di sangue.cite-ref-83[83]

Per eseguire un differenziale manuale dei globuli bianchi, il microscopista conta 100 cellule sullo striscio di sangue e le classifica in base al loro aspetto; talvolta vengono contate 200 cellule.cite-ref-84[84] Questo fornisce la percentuale di ciascun tipo di globuli bianchi e moltiplicando queste percentuali per il numero totale di globuli bianchi, è possibile ottenere il numero assoluto di ciascun tipologia.cite-ref-turgeon-85-0[85] Il conteggio manuale è soggetto a errore di campionamento perché vengono contate così poche cellule rispetto all'analisi automatizzata, ma può identificare le cellule anormali, cosa che gli analizzatori non riescono a fare,cite-ref-wintrobe-diff-70-2[70]cite-ref-gulatisong2013-76-2[76] come nel caso dei mwawgblasti che si osservano nella leucemia acuta.cite-ref-86[86] Le caratteristiche clinicamente significative, come la granulazione tossica e la vacuolazione, possono essere accertate anche dall'esame microscopico dei globuli bianchi.cite-ref-87[87]

L'mwaxqematocrito può essere eseguito manualmente riempiendo di sangue un tubo capillare, centrifugandolo e misurando la percentuale di sangue costituita da globuli rossi.cite-ref-wintrobe-hct-64-1[64] Ciò è utile in alcune condizioni che possono causare errori nei risultati automatizzati dell'ematocrito, come la mwaxkpolicitemia (un numero di globuli rossi molto elevato)cite-ref-wintrobe-hct-64-2[64] o la mwax4leucocitosi grave (un numero di globuli bianchi esageratamente elevato).cite-ref-88[88]

I globuli rossi e bianchi e le piastrine possono essere contati utilizzando un mwaykemocitometro, un vetrino da microscopio contenente una camera che, a sua volta, contiene un volume specifico di sangue diluito. La camera dell'emocitometro è incisa con una griglia calibrata per aiutare nel conteggio delle cellule. Le cellule viste nella griglia vengono contate e divise per il volume di sangue esaminato, che è determinato dal numero di quadrati contati sulla griglia, per ottenere la concentrazione di cellule nel campione.cite-ref-dacie-551r-77-1[77]cite-ref-wintrobe-cc-89-0[89] I conteggi manuali delle cellule sono laboriosi e imprecisi rispetto ai metodi automatizzati, quindi vengono utilizzati raramente, ad eccezione dei laboratori che non dispongono degli analizzatori automatici.cite-ref-dacie-551r-77-2[77]cite-ref-wintrobe-cc-89-1[89] Per contare i globuli bianchi, il campione viene diluito utilizzando un fluido contenente un composto in grado di effettuare una mwazolisi dei globuli rossi, come l'mwazsossalato di ammonio, l'mwazwacido acetico o l'mwaz0acido cloridrico.cite-ref-90[90] A volte viene aggiunta una macchia al diluente che evidenzia i nuclei dei globuli bianchi, rendendoli più facili da identificare. La conta piastrinica manuale viene eseguita in modo simile, sebbene alcuni metodi lascino intatti i globuli rossi. L'uso di un mwa0imicroscopio a contrasto di fase, piuttosto che un mwa0mmicroscopio ottico, può facilitare l'identificazione delle piastrine.cite-ref-91[91] Il conteggio manuale dei globuli rossi viene eseguito raramente, in quanto non è accurato e altri metodi come l'emoglobinometria e l'ematocrito manuale sono disponibili per la valutazione dei globuli rossi; ma se è necessario, i globuli rossi possono essere contati nel sangue dopo che è stato diluito con soluzione salina.cite-ref-92[92]

L'emoglobina può essere misurata manualmente utilizzando uno mwa00spettrofotometro o un mwa04colorimetro. Per misurare manualmente l'emoglobina, il campione viene diluito utilizzando reagenti che distruggono i globuli rossi al fine di rilasciare l'emoglobina. Altre sostanze chimiche vengono utilizzate per convertire diversi tipi di emoglobina in un'unica forma, consentendo di misurarla facilmente. La soluzione ottenuta, quindi, viene posta in una mwa08cuvetta di misurazione e l'mwa1aassorbanza viene misurata a una lunghezza d'onda specifica, che dipende dal tipo di reagente utilizzato. Uno standard di riferimento contenente una quantità nota di emoglobina viene utilizzato per determinare la relazione tra l'assorbanza e la concentrazione di emoglobina, consentendo di misurare il livello di emoglobina del campione.cite-ref-93[93]

Nelle aree rurali ed economicamente svantaggiate, i test disponibili sono limitati dalla disponibilità di attrezzature e di personale. Nelle strutture di assistenza primaria di queste regioni, i test possono essere limitati all'esame della morfologia dei globuli rossi e alla misurazione manuale dell'emoglobina, mentre tecniche più complesse, come il conteggio manuale delle cellule e i differenziali e, talvolta, il conteggio automatizzato delle cellule, vengono eseguiti nei laboratori degli ospedali regionali e provinciali, oltre che nei centri accademici, i quali in genere dispongono di analizzatori automatici. Laddove non vi siano attrezzature di laboratorio, è possibile ottenere una stima della concentrazione di emoglobina posizionando una goccia di sangue su un tipo standard di carta assorbente e confrontandola con una scala di colori.cite-ref-94[94]

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